Identifizierung und Charakterisierung des HSP70 Makronukleus-Gens aus Euplotes crassus (German, Paperback)


Diplomarbeit aus dem Jahr 1998 im Fachbereich Chemie - Biochemie, Note: 1,5, Philipps-Universitat Marburg (Unbekannt), Sprache: Deutsch, Abstract: Inhaltsangabe: Zusammenfassung: Bei dem hypotrichen Ciliaten E.crassus wurde das Makronukleus-Chromosom, welches das HSP7O-Gen tragt, identifiziert. Fur die Identifikation eines internen Gen-Fragmentes wurde die Methode der heterologen PCR angewendet. Die 5'- und 3'-Enden des Gens konnten mit einem telomerspezifischen Primer und mit homologen Primern, die aus dem internen PCR-Fragment abgeleitet wurden, amplifiziert werden. Nach Sequenzierung der PCR-Fragmente und einem Vergleich der abgeleiteten Aminosauresequenzen mit Aminosauresequenzen aus weiteren Organismen wurde eine Homologie von bis zu 95 % festgestellt. Untersuchungen zur Kopienzahl zeigten, dass im Makronukleus das HSP7O-Gen in einer Kopienzahl von 2000-2500 Kopien vorlag. Dies entsprach der durchschnittlichen Kopienzaht von E.crassus. Um Promotor-Elemente zu identifizieren, wurde der Transkriptionsstartpunkt bestimmt. Eine Analyse der 5'-nicht kodierten Region zeigte, dass keine Sequenzhomologie zu den bekannten core-Promotor-Elementen TATA-Box und Initiator-Element bestand. Durch Sequenzvergleiche mit der bekannten Konsensussequenz der Hitze-Schock-Elemente wurden jedoch zwei Hitze-Schock-Elemente identifiziert. Weitere Untersuchungen zur Expression des HSP7O-Gens nach Hitzeschock und ohne Hitzeschock erfolgten sowohl auf der Ebene der RNA als auch auf der Protein-Ebene. Durch eine Northern-Blot-Analyse wurde eine erhohte Transkripmenge der HSP70-mRNA in hitzeinduzierten Ciliaten festgestellt. Auf der Protein-Ebene zeigte sich jedoch kein quantitativer Unterschied zwischen hitzeinduzierten und nicht hitzeinduzierten Zellen. Inhaltsverzeichnis: Inhaltsverzeichnis: 1.ZUSAMMENFASSUNG1 2.EINLEITUNG2 2.1Die Genomorganisation des hypotrichen Ciliat Euplotes crassus2 2.2Konjugation und Makronukleusentwicklung bei Euplotes crassus4 2.3Transk: riptinelle Regulation d

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Diplomarbeit aus dem Jahr 1998 im Fachbereich Chemie - Biochemie, Note: 1,5, Philipps-Universitat Marburg (Unbekannt), Sprache: Deutsch, Abstract: Inhaltsangabe: Zusammenfassung: Bei dem hypotrichen Ciliaten E.crassus wurde das Makronukleus-Chromosom, welches das HSP7O-Gen tragt, identifiziert. Fur die Identifikation eines internen Gen-Fragmentes wurde die Methode der heterologen PCR angewendet. Die 5'- und 3'-Enden des Gens konnten mit einem telomerspezifischen Primer und mit homologen Primern, die aus dem internen PCR-Fragment abgeleitet wurden, amplifiziert werden. Nach Sequenzierung der PCR-Fragmente und einem Vergleich der abgeleiteten Aminosauresequenzen mit Aminosauresequenzen aus weiteren Organismen wurde eine Homologie von bis zu 95 % festgestellt. Untersuchungen zur Kopienzahl zeigten, dass im Makronukleus das HSP7O-Gen in einer Kopienzahl von 2000-2500 Kopien vorlag. Dies entsprach der durchschnittlichen Kopienzaht von E.crassus. Um Promotor-Elemente zu identifizieren, wurde der Transkriptionsstartpunkt bestimmt. Eine Analyse der 5'-nicht kodierten Region zeigte, dass keine Sequenzhomologie zu den bekannten core-Promotor-Elementen TATA-Box und Initiator-Element bestand. Durch Sequenzvergleiche mit der bekannten Konsensussequenz der Hitze-Schock-Elemente wurden jedoch zwei Hitze-Schock-Elemente identifiziert. Weitere Untersuchungen zur Expression des HSP7O-Gens nach Hitzeschock und ohne Hitzeschock erfolgten sowohl auf der Ebene der RNA als auch auf der Protein-Ebene. Durch eine Northern-Blot-Analyse wurde eine erhohte Transkripmenge der HSP70-mRNA in hitzeinduzierten Ciliaten festgestellt. Auf der Protein-Ebene zeigte sich jedoch kein quantitativer Unterschied zwischen hitzeinduzierten und nicht hitzeinduzierten Zellen. Inhaltsverzeichnis: Inhaltsverzeichnis: 1.ZUSAMMENFASSUNG1 2.EINLEITUNG2 2.1Die Genomorganisation des hypotrichen Ciliat Euplotes crassus2 2.2Konjugation und Makronukleusentwicklung bei Euplotes crassus4 2.3Transk: riptinelle Regulation d

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Product Details

General

Imprint

Diplom.de

Country of origin

United States

Release date

August 1998

Availability

Expected to ship within 10 - 15 working days

Authors

Dimensions

210 x 148 x 5mm (L x W x T)

Format

Paperback - Trade

Pages

88

ISBN-13

978-3-8386-1008-5

Barcode

9783838610085

Languages

value

Categories

LSN

3-8386-1008-3



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